核酸提取試劑是提取生物樣本核酸的輔助試劑,研究人員利用其可以將生物樣本中的DNA、RNA提取出來,用于下游實驗室、檢測機構。很多人都想知道常見核酸提取試劑有哪些?目前常見的核酸提取試劑有核酸提取試劑(磁珠法),核酸提取試劑(離心柱法)這兩種,下面慧慶小編就為大家介紹這兩類試劑的提取原理以及注意事項。
一、核酸提取試劑的提取原理
1、核酸提取試劑(離心柱法)
核酸提取試劑(離心柱法)的是一種比較簡單的用于微量核酸分離純化的方法,屬于硅吸附方法的一種,其提取原理是利用裂解液使得細胞破碎,將細胞中的核酸釋放出來,然后把釋放出來的核酸特異吸附在特定的硅載體上,這種載體只對核酸有比較強的親和力和吸附力,而對蛋白質(zhì)、脂類以及多糖等其他生化成分,則基本不吸附,因此離心時被甩出柱子。接著再利用洗脫液將吸附在特異載體上的核酸洗脫下來,分離得到純化后的核酸。
2、核酸提取試劑(磁珠法)
核酸提取試劑(磁珠法)是目前應用范圍比較廣的試劑,相比離心柱法,它操作簡單,提取速度快、得率好、純度高,因此得到了廣泛推廣和使用。它的提取原理是運用納米技術對超順磁性納米顆粒的表面進行改良和表面修飾,對超順磁性納米顆粒的表面進行改良和表面修飾,通過高活性的表面活性基團與核酸分子特異性識別和快速結合。利用氧化硅納米微球的超順磁性,在變性劑(鹽酸胍、異硫氰酸胍等)和外磁場的作用下,能從血液、組織、食品、病原微生物等樣本中分離核酸。
二、使用核酸提取試劑的注意事項
1、使用核酸提取試劑之前,應當仔細閱讀試劑說明書,并且按照說明書上仔細操作。
2、操作人員應當經(jīng)過相關培訓且有一定的經(jīng)驗,在作業(yè)過程中需要戴好口罩、手套。
3、實驗室所用的耗材需保證RNase free,實驗結束后應當立即清潔工作臺。
4、使用試劑前,低溫保存的核酸提取試劑應當恢復到室溫后再行使用,試劑應充分混勻。
5、不同批號的試劑不能混用,超出有限期的產(chǎn)品嚴禁使用。
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