核酸提取是生物學(xué)試驗(yàn)的重要步驟,想要對(duì)生物的核酸進(jìn)行檢測(cè),就要先從生物樣本中提取出核酸,而核酸提取試劑盒就是專(zhuān)用于核酸提取的試劑。很多人都不太了解核酸提取試劑盒的工作原理,今天慧慶小編就為大家介紹這類(lèi)試劑盒的工作原理與操作步驟。
一、核酸提取試劑盒的工作原理
1、磁珠法核酸提取試劑盒
磁珠法核酸提取試劑有著提取速度快、得率高、純度高的特點(diǎn),是目前被廣泛推廣使用的核酸提取試劑。其工作原理是利用生物磁珠高活性的表面基團(tuán)與生物樣本中的核酸進(jìn)行特異性識(shí)別和快速結(jié)合,接著再利用生物磁珠的超順磁性,加入變性劑(如:鹽酸胍、異硫氰酸胍等)和外磁場(chǎng)的作用下,將核酸從生物樣本中分離出來(lái),采用此種方法提取出來(lái)的核酸可以用于分子生物學(xué)研究、臨床疾病診斷、法醫(yī)學(xué)鑒定、輸血安全等多種領(lǐng)域。
2、離心柱法核酸提取試劑盒
這類(lèi)試劑盒的工作原理是將對(duì)核酸有吸附作用的官能基團(tuán)固定在離心柱模上,然后加入不同的裂解試劑、洗滌試劑并反復(fù)離心,將核酸與雜質(zhì)分離,獲得純化的核酸。
二、核酸提取試劑盒的操作步驟
1、磁珠法核酸提取試劑盒
先使用裂解液破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),使得生物樣本中的核酸能夠充分游離出來(lái),然后加入磁珠結(jié)合液,讓核酸與磁珠能夠充分結(jié)合,接著加入洗滌液,多次洗滌去除殘留的雜質(zhì),然后加入洗脫液,分離核酸與磁珠,得到高質(zhì)量的核酸溶液。
2、離心柱法核酸提取試劑盒
先加入含有高濃度離液鹽的裂解緩沖液,再加入消化緩沖液,使蛋白質(zhì)變性、消化,暴露DNA,恒溫孵育幾分鐘,然后加入試劑沉淀DNA,接著將其轉(zhuǎn)移到吸附柱以后經(jīng)過(guò)高速離心或者負(fù)壓法的操作,核酸會(huì)特異地吸附到硅膠膜上。接著加入漂洗液,在高速離心以后雜質(zhì)會(huì)被甩出離心柱。之后加入洗脫液,把硅膠模上吸附的核酸洗脫下來(lái),在高速離心之后就可以得到純化的核酸溶液。
關(guān)于核酸提取試劑盒的工作原理與操作步驟,以上就慧慶小編帶來(lái)的相關(guān)介紹,希望能夠?qū)δ兴鶐椭?。目前常用的兩種核酸提取試劑盒,磁珠法與離心柱法都有著各自的優(yōu)勢(shì),使用者可以根據(jù)自身需求進(jìn)行選擇。如果您還有其他疑問(wèn),歡迎隨時(shí)來(lái)電咨詢(xún)洛陽(yáng)慧慶生物科技有限公司,我們會(huì)及時(shí)解答您的疑惑。