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磁珠法核酸提取的誤區(qū)有哪些?

時(shí)間:2023-02-14 11:34:03 來源:洛陽慧慶生物科技有限公司
  磁珠法核酸提取在科研、基因工程、動物醫(yī)學(xué)、植物研究、檢驗(yàn)檢疫等多個(gè)領(lǐng)域的應(yīng)用都比較廣泛,核酸提取比較注重效率以及結(jié)果的準(zhǔn)確性,尤其是在樣本量比較大的時(shí)候。造成核酸核酸提取效果不好的原因有很多,有一些是核酸提取試劑質(zhì)量問題,有的是因?yàn)椴僮魅藛T本身對核酸提取存在誤區(qū),操作不當(dāng)造成的。本文慧慶小編主要和大家探討一下磁珠法核酸提取的誤區(qū)有哪些。
  

  磁珠法核酸提取的誤區(qū)有哪些

  

  1.磁珠使用越多提取效果越好

  
  有些操作人員認(rèn)為磁珠多加一點(diǎn),就能吸上更多的核酸,這種想法是不對的。因?yàn)榇胖楹鸵后w的比例是有一定閾值的,磁珠添加過多,將因?yàn)闊o法均勻分散于液體中,而喪失其分散的性能,洗滌過程中造成核酸磁珠和液體接觸的效率降低;磁珠過量也會吸附更多的雜質(zhì),影響除雜效果。通常情況下,磁珠法試劑盒給出的參考磁珠用量都是略微過量的,無需額外增加。
  

  2.試劑使用越多提取效果越好

  
  有些客戶在使用試劑盒時(shí)會認(rèn)為裂解效果不好就加裂解液,洗滌效果不好就加洗滌液,這是不對的。因?yàn)樵黾右后w體積,會減少磁珠碰撞幾率,導(dǎo)致吸附率的下降。所以很多時(shí)候,為了保持核酸提取效率,實(shí)際的使用量應(yīng)按照說明要求并結(jié)合實(shí)際情況適量添加。
  核酸提取試劑

  3.洗滌次數(shù)越多提取效果越好

  
  為了使得到的核酸更加純凈,使用者會在核酸雜質(zhì)過多時(shí)增加洗滌次數(shù),洗滌次數(shù)的增加確實(shí)有利于提純核酸,但是由于每次洗滌會損失一定量的核酸并增加核酸斷裂水解的可能性,所以次數(shù)一般控制在2-4次,并不是越多越好。
  

  4.樣本越多提取效果越好

  
  如果樣本不新鮮或者核酸含量少,有些使用者會增加樣本量,以達(dá)到增加核酸提取量的目的,這也是常見磁珠法核酸提取的誤區(qū)。簡單增加樣本量有時(shí)會引入過多雜質(zhì),超出裂解液裂解能力,降低提取效率。如樣本量不足,建議先經(jīng)過富集或者濃縮步驟再開始提取。
  

  5.好的磁珠就應(yīng)該在所有試驗(yàn)中效果都好

  
  磁珠的種類多樣、特性千差萬別,比如在粒徑大小、分散性、磁響應(yīng)時(shí)間、包被密度等多個(gè)方面都各有不同。所以不同磁珠所適應(yīng)的實(shí)驗(yàn)和體系也是不同的,有的在常量核酸提取中吸附效率更高、有的更適用于微量核酸提取等,一種磁珠并不能適用于所有實(shí)驗(yàn)。
  
  以上就是小編關(guān)于磁珠法核酸提取的誤區(qū)的具體介紹,希望對您有所幫助。為了獲得更好的提取效果,我們在操作之前要詳細(xì)了解相關(guān)產(chǎn)品說明,采用科學(xué)的操作方法,避免使用誤區(qū)。想要了解更多核酸提取試劑方面的知識或有采購需求,歡迎您留言或者電話聯(lián)系我們。
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